一种血浆中α1微球蛋白的提取方法
一种血浆中α1微球蛋白的提取方法,依次进行以下步骤制得,1)取α1微球蛋白免疫后的羊血浆,沉降后初步分离血细胞等多种物质;2)离心取上清,采用硫酸铵沉淀至溶液硫酸铵终饱和浓度达到33%(w/v)使血清充分沉淀;3)分离沉淀充分复溶,透析和浓缩;4)利用凝胶过滤层析柱对步骤3)处理过的滤液进行初步分离,收集含有α1微球蛋白的洗脱液;5)利用Protein G亲和层析柱对步骤4)收集到的洗脱液进行亲和层析,收集滤液进行除盐、浓缩处理后即得α1微球蛋白;6)利用SDS‑PAGE鉴定α1微球蛋白纯度。本方法步骤简单,安全性高,稳定性高且获得蛋白纯度较高,适合实验室及中试放大生产。 |
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